Beberapa band di pcr

Salah satu kemungkinan penyebab beberapa pita dalam PCR adalah anil primer nonspesifik. ... Terlalu banyak siklus PCR (lebih dari 30) juga berpotensi menyebabkan banyak pita karena meningkatnya peluang kesalahan pada setiap siklus. Kontaminasi DNA adalah faktor lain yang mungkin.

1. Mengapa ada banyak pita dalam elektroforesis gel??
2. Bagaimana Anda memecahkan masalah banyak pita di PCR??
3. Apa itu pita PCR??
4. Mengapa ada banyak band di RAPD?

Mengapa ada banyak pita dalam elektroforesis gel??

Matriks gel bertindak sebagai saringan: molekul DNA yang lebih kecil bermigrasi lebih cepat daripada yang lebih besar, sehingga molekul DNA dengan ukuran berbeda terpisah menjadi pita yang berbeda selama elektroforesis.

Bagaimana Anda memecahkan masalah banyak pita di PCR??

Jawaban Populer (1)

1. lakukan reaksi dengan kontrol negatif (tanpa template). ...
2. Meningkatkan suhu anil. ...
3. Desain ulang primer dan buat 3′ lebih panjang. ...
4. Tingkatkan waktu anil jika produk non-spesifik lebih pendek dari target Anda. ...
5. Gunakan lebih sedikit template DNA.
6. Coba touch-down PCR.

Apa itu pita PCR??

Pita atas yang samar (298 bp) mengidentifikasi produk PCR yang diamplifikasi dari satu target dalam genom. Pita bawah yang lebih cerah (238 bp) mengidentifikasi produk PCR multi-target dengan 10 salinan pengulangan dalam genom yang sama. Kedua wilayah target ini mengandung 100% situs pengikatan identik untuk primer.

Mengapa ada banyak band di RAPD?

Karena RAPD dibangkitkan dengan random annealing menggunakan primer 10-nukleotida, seseorang dapat mengharapkan untuk memiliki sejumlah fragmen setelah setiap primer digunakan. ... Bergantung pada apa yang Anda bandingkan (kurang lebih terkait secara genetik) jumlah pita polimorfik akan bervariasi.